2020版藥典修訂工作正在如火如荼進(jìn)行中，那你知道液相色譜法新增和修訂了哪些內(nèi)容嗎？與2015版藥典有哪些不同嗎？在這里就把修訂的內(nèi)容進(jìn)行總結(jié)歸納。

一、檢測器新增了電霧檢測器

2020版藥典新增了電霧檢測器，大家對電霧檢測器了解嗎？

電霧式檢測器（CAD）是一種新型通用型液相色譜檢測器，具有較寬的動態(tài)監(jiān)測范圍、較高的靈敏度和重復(fù)性、不依賴與化學(xué)結(jié)構(gòu)的信號響應(yīng)一致性、應(yīng)用廣泛和操作簡捷等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用于中性、酸性、堿性及兩性物質(zhì)等，特別是無紫外吸收、非揮發(fā)性或半揮發(fā)性物質(zhì)的檢測。

與ELSD相比，CAD具有更高的檢測靈敏度、更好的日內(nèi)和日間重復(fù)性和更寬的線性范圍。很多ELSD無法檢測到的雜質(zhì)，在CAD上具有較好的響應(yīng)。與ELSD相比，難揮發(fā)性化合物的CAD響應(yīng)與分析物的理化性質(zhì)無關(guān)，在進(jìn)入CAD的流動相組成不變的情況下，進(jìn)樣量相同的不同化合物具有相同的CAD響應(yīng)。換言之，CAD可用已知化合物的線性曲線定量未知化合物。此外，CAD做化合物純度分析所得數(shù)據(jù)更接近樣品的真實組成。

與UV相比，CAD的響應(yīng)不受化合物紫外吸收基團(tuán)的影響，半揮發(fā)和難揮發(fā)的化合物都能在CAD上具有較好的響應(yīng)，可以檢測UV無法檢測到的弱紫外吸收化合物。

圖1、電霧檢測器結(jié)構(gòu)及工作原理

電霧式檢測器有如下主要特點(diǎn)：

?基于該檢測器的設(shè)計原理與結(jié)構(gòu)，該檢測器總體上靈敏度高，如在分析葡萄糖、蔗糖和乳糖時，能檢測到0.5ng的柱上樣量；

?更高的響應(yīng)一致性，如對24種化合物在相同色譜條件下分別直接進(jìn)樣1μg（不接色譜柱），其響應(yīng)的峰面積的RSD值僅為10.7%；

?動態(tài)檢測范圍寬，達(dá)3-4個數(shù)量級；

?應(yīng)用廣泛，能分析小分子、大分子化合物，如氨基酸、蛋白、聚合物等；

?使用操作直觀簡單，維護(hù)十分簡便，工作流速0.01-2.00 ml/min，兼容Micro-LC和UHPLC。

USP收錄的脫氧膽酸（USP40 NF35 S1）和EP收錄的釓布醇（Ph. Eur. 04/20/16:2735）兩個品種，含量測定和有關(guān)物質(zhì)測定均采用電霧檢測器。

二、對藥典方法品種正文項下規(guī)定的色譜參數(shù)調(diào)整做了詳細(xì)規(guī)定

應(yīng)評價色譜參數(shù)調(diào)整對分離和檢測的可能影響，必要時，調(diào)整的方法應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的方法學(xué)驗證。調(diào)整后，系統(tǒng)適用性應(yīng)符合要求，且色譜峰出峰順序不變。

??若減小進(jìn)樣體積，應(yīng)保證檢測限和峰面積的重復(fù)性；

??若增加進(jìn)樣體積，應(yīng)使分離度和線性關(guān)系仍滿足要求。

調(diào)整梯度洗脫色譜參數(shù)時應(yīng)比調(diào)整等度洗脫色譜參數(shù)時更加謹(jǐn)慎，因為此調(diào)整可能會使某些峰位置變化，造成峰識別錯誤，或者與其他峰合并。

三、新增了測定法項下定性分析項

明確規(guī)定了常用的定性方法主要有但不限于以下幾種：

1、利用保留時間定性

保留時間（retention time）tR被定義為被分離組分從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)該組份大響應(yīng)值時的時間，也即從進(jìn)樣到出現(xiàn)某組分色譜峰的頂點(diǎn)時為止所經(jīng)歷的時間，常以分（min）為時間單位，用于反映被分離的組分在性質(zhì)上的差異。通常以在相同的色譜條件下待測組分的保留時間與對照品的保留時間是否一致作為待測成分定性的依據(jù)。

在相同的色譜條件下，待測成分的保留時間與對照品的保留時間應(yīng)無顯著性差異；兩個保留時間不同的色譜峰歸屬于不同化合物，但兩個保留時間一致的色譜峰有時未必可歸屬為同一化合物，在作未知物鑒別時應(yīng)特別注意。

若改變流動相組成或更換色譜柱的種類，待測成分的保留時間仍與對照品的保留時間一致，可進(jìn)一步證實待測成分與對照品為同一化合物。

當(dāng)待測成分（保留時間tR,1）無對照品時，可以樣品中的另一成分或在樣品中加入另一成分作為參比物（保留時間tR,2），采用相對保留時間（RRT）作為定性（或定位）、校正因子計算含量的方法。在品種項下，除另有規(guī)定外，相對保留時間以未扣除死時間的非調(diào)整保留時間按下式計算。

若需以扣除死時間的調(diào)整保留時間計算，應(yīng)在相應(yīng)的品種項下予以證明。

2、利用光譜相似度定性

化合物的全波長掃描紫外-可見光區(qū)光譜圖提供一些有價值的定性信息。待測成分的光譜與對照品的光譜的相似度可用于輔助定性分析。

二極管陣列檢測器可得到更多的信息，包括色譜信號、時間、波長的三維色譜光譜圖，既可用于輔助定性分析，還可用于峰純度分析。

3、利用質(zhì)譜檢測器定性

利用質(zhì)譜檢測器提供的色譜峰分子質(zhì)量和結(jié)構(gòu)的信息進(jìn)行定性分析，可獲得比僅利用保留時間或增加光譜相似性進(jìn)行定性分析更多的、更可靠信息，不僅可用于已知物的定性分析，還可提供未知化合物的結(jié)構(gòu)信息。